新博88娱乐-首选APP！玻璃胶盒Bis-Tris gel 是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙烯酰胺凝胶，MOPS buffer 和MES buffer 组合使用，更好的实现中大分子量蛋白和小分子量蛋白的分离。

　　注：使用荧光上样缓冲液处理过的样品，无需剥胶，无需经过染色脱色处理，即可直接在紫外灯或者LED 灯下观察到蛋白条带。

　　1.非变性胶的蛋白迁移率受到蛋白分子量、蛋白空间结构等多种因素影响。非变性胶（Native-PAGE）使用说明：

　　4.准备非变性电泳缓冲液：该产品含1 包电泳缓冲液粉末，每包粉末可用500mL ddH2O（去离子水）进行溶解，得到500mL 10X 电泳液。取50mL 母液，加450mL ddH2O，得到500mL 1X 电泳缓冲液。

　　5.内槽加满电泳液，外槽的电泳液最低须加到1/3 液面处，最高不可漫过胶板，再缓慢地将梳子拔出。

　　6.上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔，去除加样孔内残余的胶液。

　　7.上样：将非变性蛋白样品与5X 非变性loading buffer（ES005）进行4：1 混合均匀。注意枪头不要戳破凝胶，不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。

　　8.电泳条件：150 V, 60 min，当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部，或实验预定位置时，即可结束电泳。

　　9.电泳结束，取出凝胶。用刀在侧边硅胶处，沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料，即可打开玻璃板，取胶时，需在凝胶和玻璃条之间，沿着玻璃条划一刀，防止取胶时，发生粘连使胶破碎。（使用美工刀时请注意安全）

　　10.酸性蛋白（等电点pI7）正常上样电泳即可。反之，碱性蛋白（等电点pi7）带正电荷，需将电极插反（红插黑，黑插红），这时上样孔成为正极，样品向下电泳。

　　1.请参考分离谱图选择合适浓度的预制胶，以帮助您进行更好的蛋白电泳条带分离。

　　4.准备电泳缓冲液：该产品含1 包电泳缓冲液粉末，每包粉末可用500mL ddH2O（去离子水）进行溶解，得到500mL 10X 电泳液。取50mL 母液，加450mL ddH2O，得到500mL 1X 电泳缓冲液。

　　5.内槽加满电泳液，外槽的电泳液最低须加到1/3 液面处，最高不可漫过胶板，再缓慢地将梳子拔出。

　　6.上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔，去除加样孔内残余的胶液。

　　7.上样：将蛋白样品与5X 变性loading buffer进行4：1 混合均匀，加热处理。注意枪头不要戳破凝胶，不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。

　　8.电泳条件：150 V, 40~50 min，当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部，或实验预定位置时，即可结束电泳。

　　9.电泳结束，取出凝胶。用刀在侧边胶处，沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料，即可打开玻璃板，取凝胶时，需在凝胶和玻璃条之间，沿着玻璃条划一刀，防止取胶时，发生粘连使胶破碎。（使用美工刀时请注意安全）

　　2.用刀在侧边胶处，沿着玻璃板和玻璃条的缝隙切开封胶材料（箭头处），轻轻打开玻璃板；

　　3.取胶时，需在凝胶和两侧玻璃条之间沿着玻璃条划一刀，防止取胶时发生粘连使凝胶破碎。

　　玻璃胶盒系列预制胶可以兼容大部分的mini SDS-PAGE 电泳槽，包括

　　由于玻璃胶盒系列 系列预制胶比Invitrogen NuPAGE 预制胶略薄，所以需要特制的挡板，使得该系列预制胶能够适用于Life TechnologyNovex 电泳槽。如有需要，请在订购本产品时告知。

　　Bio-Rad Mini-PROTEAN 系列电泳槽的U 型密封条顶部有突起结构，而玻璃胶盒系列系列预制胶的短玻板是凹形结构，因此该部位是平的，电泳前需将具有突起结构的密封条取出后反过来安装，是平滑面朝外，从而防止漏液（如下图所示）。另有厚度约为0.5mm 的塑料垫片，请根据您电泳槽的实际宽度进行相应的增加。

　　a.将Bio-Rad 电泳槽中的U 型密封条（如图绿色部分） 拉出，注意这时的密封条两端是有突起的，突起的这面为正面，无突起的为反面。

　　b.将密封条旋转180 度(正面朝里，反面朝外)，重新装回电泳槽中，注意把密封圈周边压实，防止发生漏液。

　　2.如果需要蛋白条带更加清晰、平直，可降低电压至100-120V, 适当延长电泳时间。

　　3.电压为150V 时，1 块胶的电流在80mA 左右，2 块胶的电流在140mA 左右，随时间增加电流逐步降低。

　　4.如要重复使用电泳缓冲液， 建议每次更换内槽电泳缓冲液， 外槽根据电泳实际情况更换。为了保证最佳电泳效果，不建议重复使用电泳缓冲液。

　　5.湿转时120V 恒压转膜60-90min。为达到更好的转膜效果，可以根据预制胶上残留的预染marker 及膜上的预染marker 确定转膜效率，并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量，凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度都会影响转膜效率。大蛋白尽量选择低浓度的胶。蛋白分子量100kDa 以上10-100kDa 10kDa 以下建议甲醇浓度5% 10% 20%-30%

　　6.电泳结束后可以使用Tris-Bicine 转膜液进行转膜。将凝胶浸泡在转膜液中10-15min, 使凝胶中的缓冲

　　8.如需分离10 kDa 的蛋白，建议可以使用Cat#：HA11942尝试。如要确保电泳结果， 建议使用Cat#：

　　9.仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。